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   为什么用分光光度计测量吸光度时读数会不断变化?是因为颜色反应还没有完成吗?经分析发现并非如此。灵敏度越高,吸光值频移越大。分光光度计的设计原理和工作原理允许吸光值在一定范围内变化,仪器具有一定的精度和准确度。
  1.样品稀释浓度
  样品的稀释浓度也是一个不可忽视的因素,因为样品中,尤其是核酸样品中,不可避免地存在一些细小的颗粒。这些小颗粒的存在干扰了测试结果。为了在很大程度上减少颗粒对测试结果的影响,要求核酸的吸光值至少应大于0.1A,吸光值应优选在0.1和1.5a之间.在这个范围内,粒子的干扰相对较小,结果稳定。这意味着样品的浓度不能太低或太高(超出光度计的测量范围)。
  2.核酸本身的物理化学性质
  溶解核酸的缓冲液的pH值、离子浓度等也会导致检测时的读数漂移。所以建议使用一定pH值和较低离子浓度的缓冲液(如TE)来大大稳定读数。核酸的吸光值效应受缓冲溶液的酸碱度和离子浓度的影响。只有在一定的pH值和低离子浓度(如10mt  ris-hclph  8.0)下,才能获得准确的检测结果。水的pH值不稳定,可能导致检测误差。一些缓冲剂在紫外线范围内吸收自身。为确保准确测量,请使用与悬浮或洗脱样品时相同的缓冲液。
  3.分光光度计的操作因素
  1)使用仪器前,用户应首先了解仪器的结构和工作原理,以及各控制旋钮的功能。
  2)仪器应放置在干燥的室内,使用时放置在牢固稳定的工作台上。室内光线不宜太强。热天不能用电风扇直接吹乐器,以免灯泡灯丝不稳定发光。
  3)接通电源前,应检查仪器的安全性能,电源接线应牢固,通电应良好,各调节旋钮的启动位置应正确,然后接通电源开关。当仪器没有连接到电源时,血糖仪的指针必须在“0”划线上。否则,可以用仪表上的校正螺钉进行调整。
  4)如果测试波长变化较大,请稍等,灯处于热平衡后,重新校准“0”和“100”点,然后再次测量。
  5)使用完比色皿后,立即用蒸馏水冲洗干净,并用干净柔软的纱布擦去水迹,防止表面光滑度受损,影响比色皿的透光率。
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