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  荧光检测分析用干涉滤光片是荧光检测器中 的最重要的光学器件,滤光片组合对信噪比起至关 重要的作用。同时滤光片的质量、优劣也影响了仪 器整体的性能,所用对荧光检测分析用干涉滤光片 的质量测试成为生产制造荧光检测设备必要的环 节。
 
  本文依据《JB T 13360-2018 荧光检测分析用 干涉滤光片》使用 T10 紫外可见分光光度计及可变 角度附件对荧光分析用干涉滤光片进行检定,可以 用于对荧光分析用干涉滤光片光学性能的检验。
 
  实验方法
 
  1.1 仪器设备
 
  T10 紫外可见分光光度计
 
附件:可变角度样品架
 
  1.2 测试条件
 
  1.2.1 通带透过率测试条件
 
  波长范围:300nm~900nm
 
  测试模式:T%
 
  光谱带宽:0.2nm
 
  扫描间隔:0.2nm
 
  扫描速度:中速
 
  分色镜:测试光入射角 45°
 
  1.2.2 截止带背景截止度条件
 
  波长范围:300nm~900nm
 
  测试模式:Abs
 
  光谱带宽:0.5nm
 
  扫描间隔:2nm
 
  扫描速度:中速
 
  1.3 样品
 
  激发滤光片(长8.0mm宽5.5mm厚0.6mm) ;
 
  发射滤光片(长8.0mm宽5.4mm厚0.6mm) ;
 
  分色镜(长 8.0mm 宽 6.4mm 厚 0.6mm) ;
 
  结果与分析
 
  2.1 透过率测试
 
  (1)激发滤光片 0°角透过率谱图(图 2-1):
 
  透过率>90%范围:378.4nm~583.8nm
 
  50%截止波长:586nm
 
  中心波长:481.1nm
 
2-1 激发滤光片使用 T10 扫描 0°角透过率谱图
 
  (2)发射滤光片 0°角透过率谱图(图 2-2)
 
  透过率>90%范围 :610.2nm~860nm ;
 
  50%截止波长:607.2nm
 
图 2-2 发射滤光片使用 T10 扫描 0°角透过率谱图
 
  (3)分色镜 45°角透过率谱图(图 2-2)
 
  平均透过率>85%范围 :670nm~820nm ;
 
  50%截止波长:638.8nm
 
图 2-3 分色镜使用 T10 扫描 45°角透过率谱图
 
  2.2 截止带背景截止度测试
 
  (1)激发滤光片吸光值谱图(图 2-4):
 
  OD 大于 4 范围:596nm~855nm
 
图 2-4 激发滤光片使用 T10 扫描吸光值谱图
 
  (2)发射色滤光片吸光值谱图(图 2-5):
 
  OD 大于 4 范围:475nm~590nm
 
图 2-5 蓝绿色滤光片使用 T10 扫描吸光值谱图
 
  2.3 重复性测试
 
  (1)滤光片透过率重复性测数据(表 2-1)
 
  表 2-1 发射滤光片重复性检测结果
 
图 2-6 发射滤光片扫描透过率重复性谱图
 
  (2)滤光片背景截止度重复性测数据(表 2-2)
 
  表 2-2 发射滤光片检测结果
 
图 2-7 发射滤光片扫描吸光值重复性谱图
 
  讨论
 
  本文依据《JB T 13360-2018 荧光检测分析用干涉滤光片》,使用低杂散光紫外可见分光光度计T10 及可变角度附件对 I 型荧光分析用干涉滤光片的通带透过率(要求激发滤光片和发射滤光片 0°入射透过率>90%;分色镜 45°入射透过率>85%)、截止带背景截止度(要求 OD 值>4)进行检定,结果准确,重复性好。在 0.2nm 光谱带宽的条件下噪音小,在 OD 值大于 4 时的结果依然准确,可以有效满足对荧光分析用干涉滤光片光学性能的检验的要求。
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