更新时间:2020-06-02 点击次数:3984次
分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其*的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。
紫外可见分光光度计通常分为单光束、双光束和双波长三种类型。
一、单光束紫外可见分光光度计:
单个光束指的是从光源发出的光,通过单色器等。一系列光学元件穿过吸收单元,并且当在探测器上照射时总是被照射为光束。它只有一束光(光束只能交替通过参考溶液、样品溶液),一个比色皿和一个光电转换器。工作时,光路,首先通过多特定溶液,然后通过样品溶液进行光强度测量。
单光束分光光度计的特点是结构简单、价格低,主要适用于定量分析。测量结果受电源波动的影响很大,很容易给测量结果带来很大的误差。因此,他们的地位有限。一般来说,高要求制药行业、质量检验线加上不适合使用单光束紫外可见分光光度计;
双光束紫外可见分光光度计:
双光束是一种具有两个单色光的紫外可见分光光度计。其光路设计基本上类似于单光束分光光度计。不同之处在于在单色器和吸收弛豫之间添加切割器。
该功能是将一个光束分成两个相等强度的等光,在一定频率下,一个通过参考溶液,另一个通过样品溶液。然后,检测器交替地接收参考信号和采样信号。在接收到的光信号转换成电信号后,由前置放大器放大,进一步解调为放大等,后由显示系统显示
三、双波长紫外可见分光光度计:
双波长分光光度计使用两个单色仪同时获得两个不同波长的单色光。光路是分开的。由光源发出的光被两个单色器分开,以分离波长为4:和4z的单色光。通过调光器,两个光束以一定的时间间隔交替照射到含有样品测试溶液的相同吸收室,并且测试溶液在波长4'处的透射率或吸光度。检测器显示42和42。
双波长分光光度计不仅可以测量高浓度样品、多组分混合样品,而且混浊样品比单波长测量更灵敏。更具选择性。在双波长测量中,两个波长的光通过相同的吸收单元,并且通过消除由、位置的差异和参考溶液的制备引起的误差,pJ可以显着提高测量的准确度。